结核分支杆菌ESAT_6基因蛋白的表达

【摘要】　目的　构建致病性结核分枝杆菌早期分泌性抗原靶(Early secretary antigenic target ,ESAT26) 基因的pET
原核表达载体,诱导表达并初步鉴定该蛋白。方法　设计特异性引物,用PCR 方法从结核分枝杆菌标准株H37Rv
基因组中扩增ESAT26 基因,产物通过双酶切克隆入pET232a ( + ) 质粒,经PCR、酶切、测序等方法鉴定后,转入大肠
杆菌BL21 菌体中IPTG诱导表达,并经镍柱纯化、Western2blotting 鉴定。结果　所获得ESAT26 基因序列与GenBank
公布的完全一致;表达融合蛋白相对分子质量约215 ×104 ,并能与特异性单抗结合,具有一定免疫学活性。结论　
成功表达纯化并鉴定构建了ESAT26 融合蛋白。
【关键词】　结核分枝杆菌; 早期分泌性抗原靶ESAT26 ; 载体构建; 融合表达

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