TCRVβ基因谱系分析在AIDS 疾病T 细胞克隆性研究中的应用
【摘要】运用RT-PCR 对反转录的目的cDNA 进行扩增,而后用此产物为模板进行二次PCR 扩增得到荧光产物;荧光产物通过序列分析仪的扫描进行TCRVβ基因谱系分析,并通过测定特定CDR3 长度及序列出现的频率来反映T 细胞克隆扩增的程度和功能状态,使我们更加了解AIDS 的免疫机制、药物或疫苗的治疗效果等。
【关键词】T 细胞受体β基因;T 细胞克隆性;获得性免疫缺陷综合征;
T 细胞免疫在AIDS 的疾病进程中起着重要的作用,抗原特异性的T 细胞免疫基本上可以从3 个范畴加以界定:1、T 细胞的特异性和有效功能性;2、特异性T 细胞的数量,可以通过CD4/CD8T 细胞中特异T 细胞的数目界定;3、特异性T 细胞的质量,可以由T 细胞受体i(TCR)决定,监测特异性T 细胞的质量可以更好地了解疾病的免疫状。TCR 由α(胚系基因中AV、AJ、AC 重排)、β(胚系基因中的BV、BD、BJ、BC 重排)两条多肽链组成,不同V、D、J 重排以及连接时插入的核苷酸序列,分别组成了特异的TCRα和β的CDR3 基因谱型的多样性,而这决定了TCR 的特异性。而外周血中细胞主要为携带TCRα和TCRβ的T细胞,目前在AIDS 疾病研究中对TCRβ基因的研究较为深入,现已知β区有24 个谱系,即Vβ1-Vβ24。一种CDR3 序列代表一个T 细胞克隆,通过测定特定CDR3 长度及序列出现的频率可以反映T 细胞克隆扩增的程度和功能状态,使我们更加了解AIDS 的免疫机制、药物或 疫苗的治疗效果等。
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